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什么是超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板?
這是一種經(jīng)過特殊處理的細(xì)胞培養(yǎng)耗材,其核心設(shè)計(jì)目的是最大限度地抑制細(xì)胞的貼壁附著,從而便于進(jìn)行懸浮細(xì)胞培養(yǎng)或形成三維細(xì)胞聚集體。
一、什么是超低吸附培養(yǎng)板?
普通細(xì)胞培養(yǎng)板(如TC處理)的表面是親水性的,并帶有電荷,旨在促進(jìn)細(xì)胞貼壁和生長。而超低吸附(Ultra-Low Attachment, ULA)培養(yǎng)板則恰恰相反:
表面處理:其表面經(jīng)過一種惰性的水凝膠聚合物(通常是共價(jià)鍵結(jié)合的親水聚合物) 處理。這種材料是電中性的、高度親水,但生物惰性。
工作原理:這種惰性表面無法提供細(xì)胞貼附所需的化學(xué)鍵或電荷相互作用。因此,細(xì)胞無法牢固地貼附在板底,而是在培養(yǎng)基中保持懸浮狀態(tài),或者與其他細(xì)胞相互聚集。
二、主要特點(diǎn)和優(yōu)勢
抑制細(xì)胞貼壁:解決了需要細(xì)胞保持懸浮狀態(tài)的研究需求。
促進(jìn)細(xì)胞聚集:由于細(xì)胞無法貼壁,它們會(huì)彼此尋找并聚集,自發(fā)形成3D細(xì)胞球狀體(Spheroid) 或類器官(Organoid)。
減少細(xì)胞分化:對于干細(xì)胞研究,貼壁常常會(huì)引發(fā)不必要的自發(fā)分化。使用ULA板可以維持干細(xì)胞的未分化狀態(tài)和多能性。
減少蛋白吸附:其表面同樣能有效減少培養(yǎng)介質(zhì)中蛋白質(zhì)的吸附,確保培養(yǎng)基成分的穩(wěn)定性。
模擬體內(nèi)環(huán)境:3D細(xì)胞球體能夠更好地模擬體內(nèi)細(xì)胞的真實(shí)微環(huán)境(包括細(xì)胞-細(xì)胞相互作用、營養(yǎng)和氧氣梯度等),比傳統(tǒng)的2D貼壁培養(yǎng)能提供更生理相關(guān)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
三、主要應(yīng)用領(lǐng)域
ULA培養(yǎng)板在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中應(yīng)用極其廣泛,尤其是在以下領(lǐng)域:
癌癥研究:
腫瘤球體形成:用于研究腫瘤干細(xì)胞的自我更新、增殖、耐藥性以及侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制。
抗癌藥物篩選:3D腫瘤球體對藥物的反應(yīng)更接近體內(nèi)實(shí)體瘤,因此篩選結(jié)果更具預(yù)測性。
干細(xì)胞研究:
胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的懸浮培養(yǎng):用于大規(guī)模擴(kuò)增或維持其未分化狀態(tài)。
擬胚體形成:這是干細(xì)胞定向分化為三胚層(內(nèi)胚層、中胚層、外胚層)的關(guān)鍵第一步。
類器官培養(yǎng):
在特定生長因子的誘導(dǎo)下,單個(gè)干細(xì)胞或組織 progenitor 細(xì)胞可以在ULA板中自組織形成具有空腔結(jié)構(gòu)、多種細(xì)胞類型的微小器官(如腸類器官、腦類器官、肝類器官等)。
免疫細(xì)胞研究:
用于擴(kuò)增和培養(yǎng)懸浮生長的免疫細(xì)胞,如T細(xì)胞、NK細(xì)胞等,用于CAR-T、免疫治療等研究。
毒理學(xué)研究:
使用肝細(xì)胞球體等模型來評(píng)估化合物的肝毒性,比2D模型更準(zhǔn)確。
四、與其它培養(yǎng)板的區(qū)別
特性 超低吸附(ULA)板 普通貼壁(TC)板 無處理(未涂層)板
表面性質(zhì) 共價(jià)鍵合水凝膠,親水、電中性、生物惰性 經(jīng)處理帶負(fù)電荷,親水 通常為疏水的聚苯乙烯表面
細(xì)胞行為 細(xì)胞不貼壁,形成懸浮聚集體(球體) 細(xì)胞緊密貼壁,呈單層生長 細(xì)胞貼附能力很弱,但可能不規(guī)則貼附,難以形成均勻單層
主要用途 3D球體、類器官、干細(xì)胞、懸浮細(xì)胞培養(yǎng) 常規(guī)貼壁細(xì)胞系的培養(yǎng) 有時(shí)用于短期培養(yǎng)或某些需要弱貼附的細(xì)胞
蛋白吸附 極低 中等 高
五、使用注意事項(xiàng)
輕柔操作:由于細(xì)胞處于懸浮或聚集狀態(tài),換液、加藥等操作需要格外輕柔,避免吸走細(xì)胞團(tuán)。
接種密度:形成球體的細(xì)胞接種密度至關(guān)重要,它直接決定了最終形成球體的大小和均一性。需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行優(yōu)化。
觀察與檢測:球體的觀察最好使用倒置顯微鏡。進(jìn)行MTT/CCK-8等檢測時(shí),需要選擇適用于懸浮細(xì)胞的方法。
回收細(xì)胞:回收形成的球體通常需要使用移液器 使用特定的酶進(jìn)行輕微消化分散。
注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),具體產(chǎn)品說明請咨詢品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。
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