細(xì)胞培養(yǎng)瓶的特點(diǎn)、選擇及細(xì)胞時有哪些注意事項!

　　一般實(shí)驗室在使用細(xì)胞搖瓶來培養(yǎng)細(xì)胞時總會遇到各種各樣的問題，BUSNEN本生今天跟大家分享一下我們在使用細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)細(xì)胞時的注意事項及如何來選擇細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

　　懸浮細(xì)胞常規(guī)推薦接種密度：3-5×105cell/mL，生長到2×106cell/mL左右可繼續(xù)傳代;該密度建議為理論值，實(shí)際按照每個細(xì)胞特性有波動;培養(yǎng)懸浮細(xì)胞需要穩(wěn)定的生長環(huán)境，少操作，少觀察，更有利于細(xì)胞生長;

　　不建議將聚團(tuán)的細(xì)胞頻繁吹散，等待密度高和狀態(tài)改善時，細(xì)胞會自行散開;部分細(xì)胞聚團(tuán)生長為特性，吹散不利于生長，請注意查看相關(guān)培養(yǎng)說明;有些細(xì)胞本身就是聚團(tuán)生長(NK92,NK92MI,JURKAT,H209,ATT20等)，有些細(xì)胞本身就形態(tài)不圓(H9等)，為正常現(xiàn)象，無需特殊處理;

　　豎瓶培養(yǎng)可以促進(jìn)細(xì)胞生長，但由于拿出來觀察時都是橫瓶，觀察久了細(xì)胞會貼到底部，觀察完再次豎起來就會有細(xì)胞掛在瓶底部，而細(xì)胞沒有培養(yǎng)基滋潤很快就會死掉并殘留在壁上，從而導(dǎo)致養(yǎng)著養(yǎng)著細(xì)胞越來越少，貼壁細(xì)胞越來越多;因此，在培養(yǎng)瓶豎置操作時需注意吹下細(xì)胞搖瓶底部的細(xì)胞，避免細(xì)胞殘留。

　　作為一種應(yīng)用廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)容器，它有哪些特點(diǎn)，我們又該如何選擇呢?

　　首先，細(xì)胞培養(yǎng)瓶由聚苯乙烯原料制成，具有很好的透明度，方便透過瓶體觀察細(xì)胞的生長狀況。

　　其次，這種耗材有TC處理和未TC處理兩種表面，分別適用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。

　　第三，瓶子采用寬瓶頸設(shè)計，接觸無sijiao，方便移液管和細(xì)胞刮刀的進(jìn)入。

　　第四，瓶子底部留有透氣孔，有利于培養(yǎng)箱內(nèi)部氣體快速進(jìn)入細(xì)胞瓶周圍，縮短細(xì)胞瓶從常溫環(huán)境移入的回溫時間。

　　第五，蓋子有透氣蓋和密封蓋兩種類型，密封蓋適用于密封條件下的細(xì)胞和組織培養(yǎng)，透氣蓋則適用于開放的培養(yǎng)條件，瓶蓋透氣膜疏水化設(shè)計，與液體接觸后不影響透氣膜的密封性和透氣效果。

　　在選擇細(xì)胞培養(yǎng)瓶的時候我們要搞清楚細(xì)胞的種類及培養(yǎng)環(huán)境，根據(jù)這兩點(diǎn)來確定是選擇TC處理表面還是未TC處理表面，以及透氣蓋還是密封蓋。最后，根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模確定瓶子的規(guī)格。

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